Analyse de Cytotoxicité
Directives Claires
pour Tests Cytotoxiques Conformes ISO
Les tests de cytotoxicité sont l’une des méthodes les plus couramment utilisées pour évaluer la sécurité biologique des dispositifs médicaux. Cependant, les retards dans l’approbation réglementaire, la confusion quant à la bonne approche de test et la répétition de tests due à des essais de cytotoxicité non concluants sont autant d’obstacles qui augmentent les délais et le budget et limitent l’avancée du projet. L’incertitude concernant le nombre d’échantillons, les méthodes d’extraction et le bon test à réaliser pour votre matériau ou indication aggrave souvent le défi.
Le réseau de laboratoires Eurofins Medical Device Services offre une expertise technique approfondie, un accompagnement complet de projet et des plateformes d’essai de pointe pour vous aider à éviter ces problèmes et avancer en toute confiance. Forts de plus de 30 ans d’expérience dans les tests de sécurité biologique et d’un historique de conformité aux normes ISO 10993-5 et USP <87>, nous proposons des tests de cytotoxicité rapides et flexibles, adaptés à votre dispositif médical et à votre stratégie de soumission. Nous interprétons également les résultats et identifions les causes des échecs , fournissons des évaluations des risques toxicologiques pour les essais qui ont échoués et livrons des rapports clairs qui soutiennent une documentation prête à être soumise.
En tant qu’outil de dépistage essentiel et point final d’une évaluation biologique pour les soumissions réglementaires, la cytotoxicité évalue le potentiel d’un matériau à inhiber la croissance cellulaire ou à provoquer la mort cellulaire. Ces essais in vitro, réalisés selon des méthodes qualitatives ou quantitatives, fournissent une analyse rapide et sensible de la réactivité biologique des substances lixiviables ou diffusibles. Le réseau de laboratoires Eurofins Medical Device Services applique des techniques de culture cellulaire validées — démontrées comme représentatives des tests in vivo sur animaux — pour confirmer que les dispositifs médicaux utilisés sont sûrs dans ou sur le corps humain. La méthode de test appropriée est sélectionnée en fonction de la nature de l’échantillon, du site prévu et des conditions d’utilisation. Nous collaborons avec vous pour choisir le bon test à réaliser selon la densité du dispositif médical, son extractibilité et son usage prévu.
| Caractérisation | Système de test | ||
| Contact cellulaire avec l’extrait / la solution de l’élément testé | Inhibition de la croissance / viabilité | Qualitatif | Test d’élution |
| Quantitatif |
XTT MTT BCA |
||
| Capacité de formation de colonies | Quantitatif | Essai de formation de colonies | |
| Contact direct avec les cellules | Inhibition de la croissance – zones de réactivité | Qualitatif | Essai par contact direct avec les cellules |
| Contact cellulaire indirect | Inhibition de la croissance – indices de décoloration et de lyse | Qualitatif | Test de diffusion sur agar |
Réglementation et Méthodes
Recouvrement par Agarose
Test de diffusion sur agar
Essai de Formation de Colonies
Essai par Contact Direct avec les Cellules
Essai d’élution dans le MEM
Méthodes d’évaluation Quantitative
Dosage BCA
Coloration MTT
Coloration au rouge neutre (NRU)
Coloration XTT
Réglementaire
ISO 10993-5:2009 "Évaluation biologique des dispositifs médicaux Partie 5 : Essais concernant la cytotoxicité in vitro
Fournit les exigences générales pour l’évaluation du potentiel cytotoxique d’un dispositif médical.
ISO 10993-1 Tableau A.1 – "Paramètres à prendre en compte dans une évaluation du risque biologique"
Quel test est le mieux adapté pour évaluer mon dispositif médical?
Test de diffusion sur agar
Le test de diffusion sur agar est une option lorsque l’échantillon d’essai ne peut pas être extrait ou dissout dans un milieu de culture cellulaire. Il est également important que l’échantillon puisse diffuser à travers la couche d’agar sans réagir avec celle-ci. Le client doit fournir une justification du choix de cette méthode afin de pouvoir soumettre son matériau d’essai selon cette approche (conformément aux normes ISO 10993-5 et ISO 7405)
Dosage BCA
Le dosage BCA peut être utilisé pour des soumissions en Europe centrale, tandis que les tests XTT et MTT sont tous deux acceptés pour les soumissions à l’échelle internationale. Ces trois méthodes sont réalisées à partir d’extraits ou de solutions du matériau d’essai, conformément à la norme ISO 10993-5.
Le test XTT est préféré au test MTT, car il produit un formazan soluble dans l’eau, évitant ainsi une étape de solubilisation avant la mesure.
Essai de Formation de Colonies
L’essai de formation de colonies est spécifiquement requis par les autorités japonaises, conformément à la norme ISO 10993-5 et aux directives du MHLW (Ministère de la Santé, du Travail et du Bien-être du Japon).
Essai par Contact Direct avec les Cellules
Le test par contact direct avec les cellules est conçu pour les matériaux d’essai ayant une surface plane, qui ne sont ni des matériaux à faible densité, ni à haute densité. L’échantillon est appliqué directement sur les cellules, conformément à la norme ISO 10993-5.
Essai d’élution
Le test d’élution est conçu pour l’évaluation des extraits de plastiques élastomères ou de matériaux polymères. Il est particulièrement adapté aux matériaux à haute densité, conformément à la pharmacopée américaine USP <87>. Ce test peut être combiné aux exigences de la norme ISO 10993-5 pour réaliser des évaluations dose-réponse et des analyses quantitatives de la cytotoxicité.