Résumé du webinaire : Le titrage des antibiotiques : on vous dit tout… ou presque !
L’activité d’un antibiotique est estimée par comparaison de l’inhibition de la croissance de microorganismes sensibles provoquée respectivement par des concentrations connues de l’antibiotique à examiner (titre théorique du produit fini – échantillon) et d’une substance de référence (étalon SCR ou USP avec titre connu).
Un titrage de routine se fait par la préparation de l’étalon et de l’échantillon afin d’obtenir des solutions de travail de l’échantillon ayant une concentration théorique équivalente à celle de l’étalon. A partir de ces solutions de travail (échantillon et étalon), il est effectué une préparation par dilution des gammes de titrage pour l’étalon et l’échantillon qui seront déposées dans des cupules ou des cylindres.
Les solutions antibiotiques diffusent dans le milieu gélosé ensemencé, créant après incubation, des diamètres d’inhibition qui seront importés dans une feuille « Combistats » (software d’analyse statistique de l’EDQM) pour vérifier la conformité du titrage par une analyse statistique, puis un calcul du titre de l’activité de l’échantillon.
Dans le cadre de la validation de méthode, un certain nombre de tests seront requis afin de s’assurer de la fiabilité des résultats dans les conditions opératoires du laboratoire. Il s’agira notamment de la gamme de validation, de la spécificité / sélectivité, de la linéarité, de l’exactitude et de la fidélité (répétabilité et fidélité intermédiaire).
Speaker :
Alain Pontonnier, Studies Director BioPharma Microbiology